产品货号:
GL1217
中文名称:
CTAB抽提液
英文名称:
产品规格:
500mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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从植物组织中制备基因组DNA较常采用的方法有氯化离心法、CTAB抽提法等,CTAB抽提法是经典的植物DNA提取法,可以用于多种不同类型植物样品DNA的提取,获得的量很高,但是纯度一般,但是足够用于大多数分子生物学实验。
CTAB抽提液的有效成分为CTAB(十六烷基三乙基溴化铵),临用前加入2-ME,使其更有效,更稳定。
组分 | 规格 |
CTAB抽提液 | 500mL |
2-ME | 10mL |
保存:室温,避光,有效期2年。
- 液氮\研钵或匀浆器、离心管、恒温箱或水浴锅、离心机
- 氯仿/异戊醇(24:1)、75%乙醇
- 如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
- 取5mL适量的CTAB抽提液,按CTAB抽提液∶2-ME=50∶1的比例混匀,置于15mL或其他规格的离心管中,60℃预热;如有必要可加入1~5μg/mL的RNase A,以便去除残余的RNA。
- 称取1~1.5g或适量新鲜植物组织或叶片,用预冷的液氮或干冰冷却研钵或匀浆器,将新鲜植物组织或叶片粉碎成细粉末,将冷冻的组织转移至离心管中。
- 向粉碎后的组织中按4~5mL/g加入预热的CTAB抽提液,充分混匀,65℃温育15~60min,并不时混匀。
- 加入等体积氯仿/异戊醇(24:1),颠倒充分混匀,8000g离心5~10min,回收上层水相(即上清液,该上清液中含有所需DNA)。
- 转移上清液至新的离心管中,加入1/2~2/3体积预冷的异丙醇,轻轻混匀,室温静置使核酸沉至管底;如果观察不到沉淀,可在室温下静置数小时至过夜。
- 2000g离心2min,轻轻弃上清液。
- 在松散的DNA沉淀物上加入75%乙醇,室温静置20min,4000g离心10min,轻轻弃上清液。
- 自然干燥DNA,加入适量去离子水或TE缓冲液;如有必要可加入1~5μg/mL的RNase A,以便去除残余的RNA,-20℃保存。
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